杭州环特生物科技股份有限公司

免疫毒性指标有3个：（1）应用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼，观察中性粒细胞数量；（2）应用转基因巨噬细胞绿色荧光斑马鱼，观察巨噬细胞数量（荧光强度）；（3）注射红色荧光微球，巨噬细胞吞噬微球排出体外

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【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和供试品组（供试品通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。

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我们检测过敏有两种方法。1. 类胰蛋白酶的含量：用酶标仪检测类胰蛋白酶的含量。2. 肥大细胞数量：制作病理切片，经过过碘酸雪夫染色，肥大细胞呈蓝色，肥大细胞释放的组胺和白三烯等物质呈红色。

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斑马鱼的心血管系统发育过程与人类有许多共同点，与人类的心脏发育具有相似的基因调控途径，其心脏发育可以直接用眼睛观察，具有高度的可视性。

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斑马鱼药物毒理学评价技术已经通过了美国FDA和欧洲EMA的GLP认证，中国也已将斑马鱼模型的研究列入“重大新药创制”专项。利用斑马鱼进行毒性和安全性评价具有可靠、快速的优点，能同时看到各个器官的影响。

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经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抗肺炎药物在中性粒细胞、炎症基因表达和病理结构均与正常对照组相似，未出现模型对照组的中性粒细胞数显著增加炎症基因表达水平明显升高和病理出现中性粒细胞渗出的情况。

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依托斑马鱼实验能力和创新平台资源，环特生物可为科研单位或个人提供基于斑马鱼技术的课题设计、中期审核、结题报告、样品安全与功效检测、文章发表、专利申请等科研课题整体解决方案。

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经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抗炎药组侧线上中性粒细胞数量与正常对照组数量相当，未出现模型对照组中性粒细胞募集情况，且TNF-α、COX-2、IL-1β、IL-6和IL-10炎症因子明显下调

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